實(shí)測 | 友康全自動核酸提取工作站可有效防止交叉污染！

“準(zhǔn)確、快速、便利、安全”

這是我們對工作站的要求按優(yōu)先級排序。

但“紙上談兵”終覺淺，絕知此“站”要躬行。

對此類產(chǎn)品客戶往往有一個(gè)最大的擔(dān)心——

用設(shè)備去做是否會出現(xiàn)假陽性（不同樣本的交叉污染）

為讓客戶更放心，于是我們著手深入自動化工作站測試工作，此次友康測試了真正的病毒樣本(正規(guī)渠道購自國家機(jī)構(gòu)，無傳染能力)，友康全自動核酸提取儀FE4800首次實(shí)地“試飛”圓滿成功！

一：背景知識

為什么可能會出現(xiàn)樣本的交叉污染？

——出現(xiàn)交叉污染的原因在于采樣管之間的距離，以及深孔板不同孔板之間的距離較短。以及設(shè)備轉(zhuǎn)移液體過程中，不可避免會產(chǎn)生氣溶膠。一個(gè)樣本的氣溶膠，如果落入另外一個(gè)樣本中，就會產(chǎn)生樣本的交叉污染。我們的設(shè)備可以在一個(gè)時(shí)間點(diǎn)同時(shí)處理8個(gè)樣本，客戶有疑惑很正常。

這種交叉污染為什么必須要避免？

——不是所有的交叉污染都會產(chǎn)生嚴(yán)重后果，但分子領(lǐng)域的交叉污染確實(shí)會產(chǎn)生極為嚴(yán)重的后果，原因在于在后端的檢測原理是多次復(fù)制初始的樣本。以目前臨床檢測陽性陰性分界線的CT值為35來計(jì)算，即初始樣本需復(fù)制2的35次方倍。即640億倍。初始一個(gè)核酸，經(jīng)過擴(kuò)增可擴(kuò)增至640億個(gè)核酸。是驚人的。所以，樣本只要被別的樣本污染，結(jié)果錯(cuò)誤是不可避免。

二：實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>

對友康全自動樣本處理與核酸提取工作站的使用性能做出系統(tǒng)的評價(jià)，驗(yàn)證該設(shè)備正常提取過程中，無氣溶膠污染的問題出現(xiàn)。

三：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

1、 為考驗(yàn)本提取設(shè)備在較為極端的條件下是否會存在交叉污染的情況，采用較多的強(qiáng)陽性樣本與陰性樣本進(jìn)行交錯(cuò)擺放，并進(jìn)行3個(gè)批次的重復(fù)實(shí)驗(yàn)。

2、 一批提取48個(gè)樣本，設(shè)置其中27個(gè)為含病毒樣本，同時(shí)設(shè)置21個(gè)無病毒樣本。

3、 陽性樣本的病毒濃度為109 copies/mL。（參考臨床實(shí)際陽性樣本濃度上限）

4、 帶有病毒的樣本與空樣本之間交叉間隔擺放，同時(shí)設(shè)置陽性樣本圍繞陰性樣本（下表中的陰-6樣本）以及陰性樣本圍繞陽性樣本（下表中的2-1樣本）的情況，具體擺放順序如下：

陰性樣本與陽性樣本具體布局。

四：操作步驟

1、 病毒液的配制。

2、 病毒樣本的加入。將病毒液以1：9的體積比例加入至采樣管中。共設(shè)置27個(gè)含有病毒的采樣管，分別標(biāo)記序號，并做好記錄。每個(gè)采樣管中折斷一個(gè)拭子進(jìn)去。充分振蕩  混勻。

3、 儀器所需試劑的配制。共需要三種試劑，分別為異丙醇與磁珠的混合液15.36mL（包含14.4mL的異丙醇與960μL的磁珠）、純化液38.4mL和洗脫液4.8mL。

4、 將27管按照從左向右，從上向下的順序依次插入預(yù)先設(shè)定好的孔位，將無病毒樣本的陰性對照管插入剩余的21個(gè)孔中，啟動程序，進(jìn)行提取。

5、 進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄熒光定量PCR檢測，檢測21個(gè)陰性樣本，同時(shí)設(shè)置一個(gè)含有病毒核酸的孔作為陽性對照。

6、 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行3批重復(fù)。

五：實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1、第一批次各組擴(kuò)增曲線如下：

注：只有陽性對照組出現(xiàn)擴(kuò)增曲線，陰性對照和其余各組均沒有擴(kuò)增出來。

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：

2、第二批次各組擴(kuò)增曲線如下：

注：只有陽性對照組出現(xiàn)擴(kuò)增曲線，陰性對照和其余各組均沒有擴(kuò)增出來。

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：

3、第三批次各組擴(kuò)增曲線如下：

注：只有陽性對照組出現(xiàn)擴(kuò)增曲線，陰性對照和其余各組均沒有擴(kuò)增出來。

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：

六：實(shí)驗(yàn)結(jié)論

同一批提取檢測中，陰性樣本與陽性樣本交叉擺放，結(jié)果陰性樣本孔均檢出，陽性對照孔正常檢出。說明本設(shè)備可以有效避免樣本間交叉污染的問題出現(xiàn)。

寫在后面：

目前市場上所有的核酸自動化工作站，我們選擇成為為數(shù)不多為用戶提供設(shè)備使用樣本的實(shí)測數(shù)據(jù)的供應(yīng)商。之后我們會繼續(xù)進(jìn)行多批次多樣本的測試，以確保該設(shè)備確實(shí)能夠滿足客戶的需求。讓我們一起拭目以待！