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知識科普:CIK細胞培養(yǎng)

2023-04-10

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CIK細胞,即細胞因子誘導的殺傷細胞(Cytokine-Induced Killer, CIK)是一種新型的免疫活性細胞。CIK細胞培養(yǎng)是什么呢?接下來和小編一起來了解一下吧!

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在進行CIK細胞培養(yǎng)首先是CIK細胞的采集,共分為3步驟:1.用血細胞分離機采集患者自身的外周血單個核細胞50-100mL;2.淋巴細胞分離液密度梯度離心法進一步純化單個核細胞(PBMC);3.無血清培養(yǎng)液洗滌2次,獲得純度在90%以上的PBMC。然后便是CIK細胞培養(yǎng):1. 將PBMC按1-2x 106/ml的濃度懸浮于無血清培養(yǎng)液中,加入1,000 U/ml的重組人IFN-γ,37oC,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng);2. 24h后加入50ng/ml的CD3單克隆抗體和300 U/ml的重組人IL-2,刺激CIK細胞的生長和增殖;(注:此時也可同時加入100 U/ml的重組人IL-1α。)3. 每3天半量換液或擴瓶一次,并補加重組人IL-2 300 U/ml;4. 在培養(yǎng)的第14d,收獲CIK細胞。


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