2021-09-28
行業(yè)熱點(diǎn)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（UCMSC）分離是指通過機(jī)械、酶消化或組織培養(yǎng)獲得單細(xì)胞懸浮液，然后通過臍帶間充質(zhì)培養(yǎng)基獲得間充質(zhì)干細(xì)胞的過程。由于間充質(zhì)干細(xì)胞具有壁生長的特點(diǎn)，特別是在塑料培養(yǎng)瓶中，可以使用簡單的塑料培養(yǎng)瓶去除大部分雜質(zhì)細(xì)胞，獲得相對較高的純度UCMSC。
采集的新鮮臍帶組織用生理鹽水或平衡液清洗，必要時(shí)用含有青霉素/鏈霉素的生理鹽水或平衡液（雙抗）浸泡5~10分鐘，以最大限度地降低污染風(fēng)險(xiǎn)，然后用組織均勻漿或眼科切割或在液氮中研磨組織（切割前通常機(jī)械剝離臍帶外膜和血管），然后進(jìn)行原始分離培養(yǎng)。
原代分離常用的方法有微組織塊壁培養(yǎng)法、臍帶勻漿膠原酶消化法、改良膠原酶消化法等。
為了去除雜質(zhì)，100目濾網(wǎng)通常用于分離培養(yǎng)，然后通過均勻漿或酶消化細(xì)胞懸液。間充質(zhì)干細(xì)胞的純化主要采用貼壁傳代培養(yǎng)、差速貼壁、流式細(xì)胞分離、免疫磁珠分離等方法，可獲得純度大于99%的相對均勻的間充質(zhì)干細(xì)胞。
為獲得合格UCMSC，合格的細(xì)胞制備用品(如無菌培養(yǎng)液、無毒細(xì)胞培養(yǎng)瓶等）必須在合格的操作環(huán)境下使用（如細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)室100級操作臺(tái)），具有細(xì)胞制備技術(shù)操作技能的工作人員應(yīng)嚴(yán)格按照《細(xì)胞分離擴(kuò)增操作規(guī)范》執(zhí)行。因此，分離擴(kuò)增UCMSC質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)規(guī)范必須從源頭上建立。
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